Isolamento de Listeria monocytogenes em salsichas comercializadas no Distrito Federal / Isolation of Listeria monocytogenesin sausages commercialized in the Distrito Federal

A bactéria Listeria monocytogenes é o patógeno causador da listeriose, importante doença transmitida por alimentos que acomete humanos e animais podendo causar morte. Foram coletadas 100 amostras de salsicha de mercados do Distrito Federal. A metodologia usada para o isolamento foi a descrita na Instrução Normativa Nº 40 do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. As amostras que apresentaram motilidade característica de Listeria sp p. foram submetidas a técnica de PCR para confirmação da espécie L. monocytogenes. Os resultados positivos para Listeria sp p. foram vistos em 14 amostras e em 5 confirmou-se a presença de L. monocytogenes. Através dos resultados desse experimento conclui-se que salsichas podem estar contaminadas com bactérias do gênero Listeria sp p. e L. monocytogenes, oferecendo risco de listeriose aos consumidores.

Pesquisa de Clostridium perfringens em carnes bovinas embaladas a vácuo comercializadas no Distrito Federal e entorno / Clostridium perfringens research on vacuum packed beef commercialized on Distrito Federal and in the surrounding area

O objetivo deste trabalho foi detectar a presença de Clostridium perfringens em 54 amostras de carne bovina embaladas a vácuo comercializadas na região do Distrito Federal, bem como detectar a presença da toxina cpe por PCR, ainda avaliar os meios de cultivo ágar SPS® e ágar TSC®, com e sem etapa de pré-enriquecimento das amostras em caldo infusão de cérebro e coração (BHI) na câmara de anaerobiose, e posterior incubação das placas de SPS® e TSC® tanto em jarra de anaerobiose, como em câmara de anaerobiose. Na análise da incubação das placas em ágar SPS® e TSC®, sem a etapa de pré-enriquecimento em caldo BHI na câmara de anaerobiose, observou-se o crescimento em apenas uma (1,85%) das 54 amostras analisadas, em ambos os meios de cultivo e formas de incubação. Com a etapa de pré-enriquecimento com caldo BHI em câmara de anaerobiose, observou-se crescimento em todas as 54 amostras (100%), em ambos os meios de cultivo e formas de incubação. Na reação em cadeia de polimerase (PCR) nenhuma das cepas oriundas das amostras analisadas apresentaram a amplificação de fragmento do gene da toxina cpe. Os resultados evidenciam a presença de C. perfringens em carnes embaladas a vácuo comercializadas no Distrito Federal e Entorno, porém não foi detectada a toxina cpe em nenhuma cepa isolada analisada. Na comparação estatística aplicando o teste qui-quadrado de McNemar, observou-se que houve diferença significativa (p<0,001) entre as análises sem e com a etapa de pré-enriquecimento em caldo BHI, verificando-se a influencia positiva do meio na recuperação de esporos, destacando desta forma a importância do enriquecimento prévio em meio BHI e a incubação em câmara de anaerobiose, na recuperação de esporos deste microrganismo.

The aim of this work was to detect Clostridium perfringens in 54 samples of vacuum packed beef sold at the Federal District area, and to detect the presence of the cpe toxin gene by Polymerase chain reaction (PCR), also evaluate the culture medium SPS® agar and TSC® agar, with and without pre-enrichment step of the samples in Brain Heart Infusion (BHI) broth in the anaerobic chamber, and to promote the incubation of the plates in anaerobic jar and anaerobic chamber. The results of the incubation on SPS® agar and TSC® agar, without the pre-enrichment step in BHI, growth was observed in only one (1,85%) of the 54 analyzed samples, in both culture media and incubation methods. With the pre-enrichment step with BHI broth in the anaerobic chamber, growth was observed in all 54 samples (100%), in both culture media and incubation methods. At the PCR, In the polymerase chain reaction (PCR), none of the strains from the analyzed samples showed fragment amplification of the toxin cpe gene. The results showed the presence of C. perfringens in vacuum packed beef samples commercialized at the Distrito Federal area and surroundings, however the cpe toxin was not detected in any isolated strain analyzed. In the statistical test using the McNemar chi-square test, a significant difference (p<0,001) was observed between the analysis with and without pre-enrichment step in BHI broth, verifying the positive influence of the medium in spore recovery, therefore to enhance the importance of the pre-enrichment stage in BHI broth and the incubation in anaerobic chamber in spore recovery for this microorganism.

Avaliação da qualidade higienicossanitária de carcaças de bovinos oriundos de abatedouros frigoríficos do Distrito Federal e entorno / Evaluation of the hygiene and sanitary quality of carcasses of cattle from slaughterhouses of the Federal District and reversal

O trabalho realizado teve como objetivo avaliar a qualidade higienicossanitária de carcaças bovinas, oriundas de abatedouros-frigoríficos sob Inspeção Distrital (Dipova) e Federal (SIF), localizados na região do Distrito Federal e Entorno. Foram realizadas análises microbiológicas para Contagem de micro-organismos Mesófilos aeróbios estritos e facultativos, identificação do Número mais Provável de Coliformes a 45°C e Contagem de Staphylococcus aureus em 05 (cinco) diferentes pontos de 07 (sete) meias carcaças, nas quais as coletas foram realizadas antes e depois da lavagem com água clorada, perfazendo assim um total de 70 análises. Os valores médios dos resultados observados, antes da lavagem com água clorada, para Contagem de micro-organismos Mesófilos aeróbios estritos e facultativos, foram de 9,7 UFC/cm²; para Número Mais provável de Coliformes a 45ºC, de 29 germes/cm² e para Staphylococcus coagulase positivo, de 1 UFC/cm². Os valores observados nas meias carcaças, após a lavagem com água clorada na Contagem de micro- -organismos Mesófilos aeróbios estritos e facultativos foram de 1,5 UFC/ cm²; para a análise de Número Mais Provável de Coliformes a 45ºC, foi de 8,2 germes/cm² e não houve crescimento de Staphylococcus coagulase positiva. Neste trabalho verificou-se a presença de Coliformes a 45ºC e a Contagem de micro-organismos Mesófilos aeróbios estritos e facultativos antes e após a lavagem das meias carcaças e a presença de Staphylococcus coagulase positiva apenas antes das lavagem das mesmas. A lavagem das meias carcaças com água clorada diminuiu o grau de contaminação.(AU)

Avaliação da qualidade microbiológica de queijos do tipo Minas padrão de produção industrial, artesanal e informal / Microbiological evaluation of Minas type cheeses from industrial, artisanal and informal manufacturing

Os objetivos deste estudo foram de avaliar a qualidade microbiológica de queijos do tipo Minas padrão,produzidos de forma industrial com inspeção federal, artesanal com inspeções estadual e municipal (a partir de leite não pasteurizado) e informal (produção caseira), bem como de analisar os hábitos de consumo desse tipo de queijo no Distrito Federal, Brasil. As amostras (n = 21) foram submetidas a análises para a pesquisa de coliformes a 30 °C e 45 °C, Staphylococcus coagulase positiva, Listeria monocytogenes e Salmonella spp. Os resultados foram avaliados de acordo com a RDC 12/2001 da ANVISA; 57,14% das amostras de queijos industriais, 100% das informais e 100% das artesanais estavam em desacordo quanto às contagens de Staphylococcus coagulase positiva. As contagens de coliformes a 45°C estavam em desacordo em 71,42% das amostras de queijos informais e 14,28% das industrializadas e artesanais. Nenhuma amostra foi positiva para L. monocytogenes ou Salmonella spp. Um questionário simplificado sobre o consumo de queijo Minas foi aplicado a 50 pessoas no momento da compra e houve indicação de 47% de preferência ao sabor de queijos informais. Em virtude destes queijos não serem inspecionados e não seguirem padrões de produção, representam um risco à saúde pública...

Bactérias nativas indutoras de precipitação de minerais de carbonato de cálcio em solos tropicais / Native bacteria which induce calcium carbonate mineral precipitations in tropical soils / Bacterias nativas inductoras de precipitación de minerales de carbonato de calcio en suelos tropicales

As bactérias, consideradas como o grupo de microrganismos de maior abundância e diversidade que habitam os solos, são vitais no processo de bioprecipitação, no qual, estes microrganismos formam precipitados minerais cristalinos ou amorfos, como resultado de suas atividades metabólicas sob certas condições ambientais. Nesta pesquisa foram aplicados os conhecimentos sobre bactérias, para dar solução a alguns problemas da engenharia, estudando a capacidade das bactérias nativas existentes num solo tropical de precipitar minerais de carbonato de cálcio, a partir da adição do meio nutriente. Este nutriente se mostrou ótimo para induzir a bioprecipitação gerando fibras e cristais de carbonato de cálcio, que mudam as propriedades do solo, causando uma maior estabilidade estrutural dos grãos, um melhor desempenho dos agregados e uma menor deformabilidade da massa de solo.

Bacteria, considered as the group of soil microorganisms with the greatest abundance and diversity, are vital for bioprecipitation processes, where these microorganisms form crystalline or amorphous mineral precipitates as result of their metabolic activity under certain environmental conditions. In this investigation, knowledge about bacteria was applied for solving some engineering problems, studying the capacity of native bacteria found in tropical soil for precipitating calcium carbonate after the addition of a nutrient medium. This medium was optimal for inducing bioprecipitation, generating calcium carbonate fibers and crystals which modify soil characteristics, producing a greater structural stability of the grains, better performance of the aggregates, and less deformation of the ground mass.

Las bacterias, consideradas como el grupo de microrganismos de mayor abundancia y diversidad que habitan los suelos, son vitales en el proceso de bioprecipitación, en el cual estos microrganismos forman precipitados minerales cristalinos o amorfos, como resultado de sus actividades metabólicas sobre ciertas condiciones ambientales. En esta investigación, se aplicaron los conocimientos sobre bacterias para dar solución a algunos problemas de ingeniería, estudiando la capacidad de las bacterias nativas existentes en un suelo tropical de precipitar minerales de carbonato de calcio, a partir de la adición de un medio nutriente. Este nutriente resultó óptimo para inducir la bioprecipitación, generando fibras y cristales de carbonato de calcio, que varían las propiedades del suelo causando una mayor estabilidad estructural de los granos, un mejor desempeño de los agregados y una menor deformación en la masa de suelo.

Ocorrência e diferenciação de espécies de Listeria spp. em salsichas tipo hot dog a granel e em amostras de carne moída bovina comercializadas no Distrito Federal / Occurrence and differentiation of Listeria spp. in “hot dog” sausages sold in bulk and ground beef samples marketed in the Federal District, Brazil

Listeria monocytogenes é um patógeno relevante veiculado por alimentos. Sua identificação precisa é importante para a correta determinação do risco associado à ingestão do alimento. O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência das espécies de Listeria spp. em amostras de salsichas tipo hot dog e carne moída bovina, comercializadas a granel no Distrito Federal. Foram analisadas 162 amostras, sendo 127 de salsichas tipo hot dog e 35 amostras de carne moída bovina. O isolamento e a identificação do gênero foram feitos por metodologia convencional e a distinção das espécies foi verificada por kit bioquímico específico (API-Listeria®) e por análise de restrição de fragmentos da reação em cadeia da polimerase (RFLP-PCR) do gene 23 rRNA. Foram isoladas 26 cepas de Listeria spp. das amostras de salsichas tipo hot dog, sendo identificadas 18 cepas de Listeria innocua e 08 cepas de Listeria monocytogenes. Das 35 amostras de carne moída bovina, foram isoladas 16 cepas de Listeria spp., sendo identificadas 12 cepas de Listeria innocua e 04 de Listeria monocytogenes. Houve concordância total na distinção das espécies de Listeria spp. através dos dois métodos empregados. A presença de Listeria spp. em amostras de salsicha do tipo hot dog a granel e em carne moída bovina a granel, de estabelecimentos comerciais do Distrito Federal, representa risco à saúde do consumidor.

Listeria monocytogenes is a pathogen disclosed by foods. Its accurate identification is important for the correct determination of the risk associated with the ingestion of food. The aim of this research was to determine the occurrence of Listeria spp. in samples of hot dog sausages and ground beef, sold in bulk in the Federal District. A total of 162 samples, 127 hot dog sausages and 35 samples of ground beef cattle, were analyzed. The isolation and identification of the genus were made by conventional methodology and distinction of species was verified by specific biochemical kit (API-Listeria®) and by restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) of 23S rRNA gene. Twenty-six strains of Listeria spp. were isolated. Samples of hot dog sausages identified 18 strains of Listeria innocua and 08 strains of Listeria monocytogenes. Of the 35 samples of ground beef cattle were isolated, 16 strains of Listeria spp., 12 strains of Listeria innocua and 04 strains of Listeria monocytogenes. There was total agreement in the distinction of Listeria species using the two methods. The presence of Listeria spp. in samples of hot dog sausages and ground beef, sold in bulk in commercial establishment of the Federal District represents a risk to consumer health.

Caracterização das lesões por Cysticercus bovis, na inspeção post mortem de bovinos, pelos exames macroscópico, histopatológico e pela reação em cadeia da polimerase (PCR) / Characterization of Cysticercus bovis lesions at postmortem inspection of cattle by gross examination, histopathology and polymerase chain reaction (PCR)

Considerando a necessidade do conhecimento da cisticercose bovina e do aperfeiçoamento dos métodos de diagnóstico desta doença, objetivou-se verificar a ocorrência do Cysticercus bovis nos diversos locais anatômicos, tais como: cabeça, coração, esôfago, diafragma, língua, fígado e carcaça, examinados pelo Serviço de Inspeção Federal. O diagnóstico foi feito por macroscopia, microscopia e PCR com extração de DNA por fervura para a identificação do metacestóide. Dos 22043 bovinos abatidos, 713 (3,23%) estavam infectados. O coração foi o sítio anatômico mais afetado, com 1,90% (420/22043), seguido da cabeça, 1,11% (245/22043), do esôfago, 0,08% (18/22043), da carcaça, 0,07% (15/22043), do diafragma, 0,03% (7/22043), do fígado, 0,02% (5/22043) e da língua, 0,01% (3/22043). Dos cistos obtidos, 58,35% (416/713) estavam mortos e 41,65% (297/713), vivos. As diferenças entre os sítios anatômicos e a condição morfológica dos cistos foram significativas (p < 0,05). Dos 416 cistos mortos, 253 foram examinados por apresentarem características de: lesões nodulares firmes, brancacentas, com material amarelado, por vezes com aspecto calcário, no interior. O exame microscópico revelou granulomas comumente representados por centro necrótico e/ou mineralizado, envolto por histiócitos dispostos em paliçada, células gigantes multinucleadas, infiltrado misto, predominantemente de mononucleares, e fibrose. Por vezes, a periferia das lesões tinha características de tecido de granulação e mineralização em forma de lâminas lineares. Os restos parasitários foram identificados como um material hialino acelular, contendo elementos ovais e circulares, basofílicos, acidófilos e incolores, denominados corpúsculos calcários. Em algumas lesões foram observados raros corpúsculos, dispersos na reação inflamatória. Nódulos fibrosos, ricos em infiltrado linfóide ou crônico ativos, foram frequentemente visualizados. Dos cistos vivos examinados, 65% (13/20) foram positivos para C. bovis , confirmando o diagnóstico ambulatorial e a eficácia do método de PCR utilizado. Em virtude da positividade observada para C. bovis nos exames histopatológico e PCR, particularmente em fígado e esôfago, sugere-se que seja reformulado o artigo 176 do Regulamento de Inspeção Industrial e Sanitária de Produtos de Origem Animal, incluindo estes locais na rotina de inspeção nos matadouros.

Considering the importance of improving methods for diagnosis of bovine Cysticercosis, this study aimed to verify Cysticercus bovis occurrence in different anatomical sites, as head, heart, esophagus, diaphragm, tongue, liver and carcass, examined by federal inspection service. Diagnosis was performed by gross examination, histopatholgy and PCR with boiling DNA extraction for metacestode identification. Of 22043 slaughtered cattle, 713 (3.23%) were infected. The heart was mostly affected with 1.90% (420/22043), followed by head, 1.11% (245/22043), esophagus, 0.08% (18/22043), carcass, 0.07% (15/22043), diaphragm, 0.03% (7/22043), liver, 0.02% (5/22043) and tongue, 0.01% (3/22043). Of the cysts obtained, 58.35% (416/713) were dead and 41.65% (297/713) were alive. The differences among anatomical sites and cysts status were significant (p<0.05). Of the 416 dead cysts 253, characterized by nodular firm whitish lesions, containing yellowish material, some times in calcareous aspect were examined for histopathology. The histological exams of these cysts yielded granulomatous lesions, whose centers were characterized by caseous and/or calcareous material, multinucleate giant cells, histiocytes in palisade and infiltrate composed predominantly by lymphoid cells, wrapped up by fibrosis. Some times the lesions peripheries had granulation tissue and mineralized areas, like linear blade. The parasite debris were like a hyaline, non cellular material with spherical and ovoid, basophilic, eosinophilic and colorless corpuscles. These corpuscles were seen rarely, some times, among inflammatory reaction. Fibrous nodules, rich in lymphoid or mixed infiltrates, were frequently seen. Of the live cysts subjected to PCR with boiling DNA extraction, 65% (13/20) were positive for C. bovis, confirming the ambulatory diagnosis and the efficacy of the PCR procedure used. Due to microscopic and PCR diagnostic exams of C. bovis, mainly in the liver and esophagus, it is suggested changes in the 176 article of the regulatory inspection, by including these sites in the bovine routine inspection at the slaughterhouses.

Causes of condemnation of carcasses from poultry in slaughterhouses located in State of Goiás, Brazil / Causas de condenação de carcaças de aves em abatedouros localizados no Estado de Goiás, Brasil

The aim of this research was to detect the principal reasons for condemnation of poultry carcasses in two slaughterhouses (A and B); located in the southeastern region of the State of Goiás, Brazil. The data were collected by the federal veterinary inspection services of the Brazilian Ministry of Agriculture between January and April 2007. The principal causes of condemnation observed in both industries were cellulite, contusion/ fractures and bruises, as well as contamination due to gut severance at evisceration. The three main values observed for each of the causes were different between the slaughter houses. In A, cellulite was the main cause of condemnation with 51.20% of all condemnations, followed by 5.67% for contusion/ fractures and bruising and 33.61% for contamination by evisceration. In B, the major cause of condemnation was 28.90% due to fractures/ contusion and bruising, followed by 25.27% for cellulite and 22.50% for contamination. Other causes of condemnation were observed, however in minute quantities in both industries (<10% to A and <23% to B). The high cellulite occurrence in A was due to the high density of the poultry in sheds (17 or 18 chickens m-2). The greater value for fractures/ contusion and bruising verified in B was due to the inefficiency during capture in the sheds and putting on hooks in the slaughterhouse. Carcass lesions were also caused by insensitization because of non-uniformity in the poultry groups. Contamination by residues due to gut severance, mainly intestines, was attributed to problems in adjustment of machinery and non- uniformity of lots in industry A. In industry B the value detected within an acceptable level of failure in evisceration for machine, according to the manufacturer. All problems observed suggest a failure in handling, cellulite and mainly failures in pre slaughter and slaughter procedure to prevent contusions, fractures and bruising.

O objetivo deste trabalho foi observar as principais causas de condenações de aves, em dois abatedouros frigoríficos (A e B), localizados na região Sudeste do Estado de Goiás, Brasil. Os dados foram obtidos junto ao serviço de inspeção veterinária federal do Ministério da Agricultura, entre o período de janeiro e abril de 2007. As três principais causas de condenações observadas em ambas as indústrias foram celulite, contusão/fratura e hematomas e contaminação devido à ruptura de vísceras no momento da evisceração. Entretanto, os valores observados, para cada uma das causas, foram diferentes entre os frigoríficos A e B. Em A, verificou-se que a celulite foi a maior causa de condenação, com 51,20 % do total de condenações, seguido por 5,67% de contusão/fratura e hematomas e 33,61% de contaminação na evisceração. Em B, a maior causa foi 28,90% para fraturas/ contusões e hematomas, seguido de 25,27% para celulite e 22,50% para contaminação. Outras causas de condenação também foram observadas, porém em pequenas percentagens para ambas as indústrias. Observou-se que, em A, a celulite estava relacionada à alta densidade de aves/m² nos galpões (17 a 18 aves m-2). O maior índice para fratura/contusões e hematomas observados em B foi relacionado à ineficiência na apanha e no enganchamento, bem como a traumas no momento da insensibilização devido à desuniformidade das aves. Para a contaminação por resíduos de rompimento de vísceras, principalmente alças intestinais, foi atribuído, para A, problemas na regulagem da máquina e desuniformidade do lote e, para B, o valor detectado estava dentro da margem aceitável de falhas na evisceração para a máquina evisceradora, segundo o fabricante. Os problemas verificados ainda sugerem falhas no manejo, no que se refere às celulites, e principalmente falhas nas operações de pré-abate e abate para os índices de contusões, fratura e hematomas.

Determinação do número mais provável de coliformes, em águas minerais comercializadas no Distrito Federal / Determination of most probable number of coliform bacteria in bottled mineral waters in the Distrito Federal

O objetivo deste estudo foi observar a ocorrência de coliformes totais, coliformes a 45°C (termotolerantes) e Escherichia coli em 20 amostras de águas minerais de diferentes marcas e tipos de embalagem, comercializadas no Distrito Federal. Considerando que o Brasil é o quarto maior mercado mundial de água mineral, com produção de 11,5 bilhões de litros em 2004, segundo dados do relatório da Associação Brasileira das Indústrias de Água Mineral (ABINAM), torna-se fundamental que essa água seja analisada periodicamente, com o compromisso de assegurar que o produto disponibilizado no mercado esteja de acordo com os parâmetros estabelecidos pela legislação vigente, não oferecendo risco à saúde do consumidor. Para a análise, foi utilizada a técnica dos tubos múltiplos, da Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater da American Public Health Association, método que permite determinar o número mais provável (NMP) dos microrganismos pesquisados.(...) Tendo em vista que tratamentos não podem ser utilizados para a eliminação ou a redução da contaminação microbiológica no produto envasado, práticas higiênico-sanitárias rigorosas devem ser adotadas para assegurar a qualidade da água na fonte, durante o envase e após seu transporte e distribuição.

Avaliaçäo fisico-química e microbiológica das soluçöes desinfetantes de sulfato de cobre a 5 por cento e cloridrato de polihexametileno biguanida a 1 por cento em pedilúvio para bovinos / Evaluation physical-chemistries and microbiology of the treatment with desinfections solutions as copper sulphate to 5 percent and chloridrate of polihexametilen biguanide at 1 percent in footbath for bovines

O propósito deste estudo foi avaliar aspectos físico-químicos e microbiológicos do sulfato de cobre a 5 por cento e cloridrato de polihexametileno biguanida (P.H.M.B.) a 1 por cento como soluçöes desinfetantes em pedilúvio para tratamento de diversas afecçöes podais em bovinos associado a procedimentos cirúrgicos e à antibioticoterapia parenteral. As análises físico-químicas constaram da determinaçäo do pH e da concentraçäo do cobre e cloridrato de polihexametileno biguanida (P.H.M.B.). As análises microbiológicas realizadas foram a contagem de microorganismos aeróbios ou facultativos mesófilos e anaeróbios mesófilos. Os resultados obtidos permitem afirmar que as características físico-químicas das duas soluçöes mantiveram-se praticamente constantes e que a soluçäo de PHMB a 1 por cento apresentou menores contagens de microorganismos aeróbios ou facultativos mesófilos e anaeróbios mesófilos do que a soluçäo de sulfato de cobre a 5 por cento.

Alguns aspectos epidemiológicos e profiláticos da tungíase em cães de Jataí, GO / Epidemiological and prophylactic aspects of tungiasis in dogs from Jataí, State of Goiás, Brazil

Aqui é relatada a ocorrência de tungíase em 21 cães procedentes de seis propriedades rurais, no município de Jataí, Estado de Goiás, no período de maio a setembro de 1998. Os animais apresentavam certa resistência em se manter em posição quadrupedal, mudavam de posiçã constantemente, lambiam os pés e nem sempre atendiam os comandos dos proprietários. Ao exame clínico, observaram-se nestes animais pequenas nodulaçöes, ligeiramente amareladas, com pontos escuros no centro e erosão dos coxins palmares e plantares. Os ectoparasitos encontrados no interior destas amostras foram identificados COMO fêmeas ovígeras de Tunga penetrans. Nas propriedades estudadas verificou-se que os cães manyinham contatos próximos e frequentes com suínos e bovinos, o que, aliado à falta de informação dos trabalhadores sobre o problema, constituiu o principal fator para a manutenção da infestação e dificuldades no controle. Todos os animais receberam tratamento com solução de triclorfon a 4 por cento, aplicada ao local afetado. Os animais se recuperaram em , aproximadamente, 20 dias.